淀粉样变性是一种全身系统性疾病，临床上较为少见。往往累及多个器官和系统，以肾脏、肝脏、心脏和皮肤多见。肝淀粉样变性临床表现多样，症状不典型，临床诊断较困难，误诊率高，明确诊断需要依赖肝组织病理检查[1]。目前尚无有效的特异性治疗方法，但是如果能够早期确诊，并且给予科学合理的早期干预，可改善患者的预后[2]。肝淀粉样变性传统病理诊断依赖于刚果红染色阳性及在偏振光下呈绿色折光。刚果红染色阴性容易造成误诊或漏诊，尤其需要与轻链蛋白沉积病（light chain deposition disease，LCDD）鉴别诊断[3-5]。本研究对诊断肝淀粉样变性患者活检病理蜡块行马松三色（Masson trichrome，MT）和硫酸阿尔新蓝（sulfated alcian blue，SAB）染色，旨在进一步观察和总结本病的临床和病理特征，以加强对该病的认识及提高诊疗水平。

1 对象与方法

1.1 研究对象

收集2012年1月至2024年4月病理诊断为淀粉样变性的病例12例，首都医科大学附属北京友谊医院和北京佑安医院各6例，其中肝穿刺标本10例、肝移植手术切除标本2例。纳入标准：①经病理确诊或者符合淀粉样变性；②患者在本院或外院有完整的病例资料。排除标准：①有严重心脑血管疾病、恶性肿瘤；②不配合随访。临床资料包括患者的一般情况、病史、临床表现、症状与体征，以及肝、肾功能和影像学检查指标等。

1.2 病理标本处置

调取12例患者的存档蜡块，利用蜡块每例均行常规苏木精-伊红（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，刚果红、MT及SAB等特殊染色，以及轻链κ、λ 免疫组织化学染色[6]。由病理科资深医师采用统一标准进行阅片。

1.3 染色方法

1.3.1 HE染色

经10%中性甲醛液固定、石蜡包埋后之蜡块，4 μm连续切片，HE染色并显微镜下观察。

1.3.2 特殊染色

1.3.2.1 刚果红染色5 μm石蜡切片脱蜡至水洗；刚果红染液5 min；氢氧化钾酒精分化液冲洗3～10 s，至无多余染液流出为止；自来水洗终止分化，刚果红染色结果为红色或砖红色；明矾苏木精染细胞核5 min；自来水洗，分化返蓝；各级酒精脱水，二甲苯透明，最后中性树胶封固。

1.3.2.2 MT染色4 μm常规脱蜡至水洗；Weigert铁苏木精染5～10 min，流水冲洗；1%盐酸酒精分化数秒，流水冲洗数分钟；丽春红酸性品红染液染5～10 min，流水冲洗；磷钼酸溶液处理约5 min，倾去玻片上磷钼酸溶液；用苯胺蓝染液复染2～3 min，倾去玻片上染液；用1%冰醋酸水溶液冲洗切片，至切片无蓝色脱出；95%酒精清洗，无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

1.3.2.3 SAB染色 石蜡切片脱蜡，蒸馏水洗净备用；将切片放入冰醋酸乙醇溶液中2 min；将切片置于SAB染色试剂中2 h；再将切片迅速放入冰醋酸乙醇溶液中2 min；流水冲洗切片，最后用蒸馏水洗净；切片放入5%硼酸钠乙醇30 min；流水冲洗切片，蒸馏水洗净；切片置于Weigert铁苏木精染色液中5 min；流水冲洗10 min，蒸馏水洗净；切片依次置于2%苦味酸乙醇溶液中20 s，流水冲洗；切片置于Van Gieson染色液中3 min；95%乙醇和无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固[6]。

1.3.3 免疫组织化学染色

鼠抗人免疫球蛋白κ、λ 单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司，均为即用型抗体。实验步骤按说明书进行。常规设阴性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗。

2 结果

2.1 一般资料

12例患者中，中位年龄为53（32～74）岁；男6例，女6例；临床表现有腹部不适疼痛6例（50.0%），腹胀6例（50.0%），厌油、乏力5例（41.7%），纳差4例（33.3%），尿黄4例（33.3%），以及肝肿大6例（50.0%），腹水6例（50.0%），慢性肾功能不全1例（8.3%）。

2.2 实验室检查指标

12例患者的肝功能、肾功能等实验室指标行回顾性分析，肝功能异常10例（83.3%），包括血清碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）升高10例（83.3%）、谷氨酰转肽酶（gamma-glutamyl transpeptidase，GGT）升高10例（83.3%）、丙氨酸转氨酶（alanine transaminase，ALT）和天冬氨酸转氨酶（aspartic transaminase，AST）正常或者轻度增高9例（75.0%），以及总胆红素（total bilirubin，DBil）增高2例（16.7%）。肾功能异常5例，蛋白尿4例。

2.3 影像学检查结果

12例患者腹部CT/MRI检查，表现为弥漫性肝病及不同程度的弥漫肝肿大（10/12，83.3%）、脂肪肝（5/12，41.7%）、条索状回声增多（4/12，33.3%）、门静脉内径增宽（4/12，33.3%），以及下腔静脉狭窄（3/12，25.0%）、合并脾肿大（3/12，25.0%）、肝硬化结节形成（2/12，16.7%）。均未见到肾脏肿大。见图1。

图1 肝脏淀粉样变性CT平扫片改变

影像示肝脏体积明显肿大，表面欠光滑，各叶比例失调。

2.4 病理形态学改变

HE染色显示，12例显微镜下均见淀粉样物质沉积于细胞之间，为无定形、玻璃状、嗜酸性物质。这些物质弥漫分布在肝窦周间隙内（图2A），肝细胞板受压萎缩甚至消失。有5例沉积在汇管区小叶间动脉、门静脉血管壁及中央静脉壁，以动脉最为显著，或者这两种形式常常共同出现（图2B）。刚果红染色显示，12例均呈橘红色或者砖红色（图2C），10例在偏振光显微镜下观察呈绿色双折光，2例未见绿色折光。MT染色显示，显微镜观察12例均呈蓝灰色或者浅蓝色（图2D）。SAB染色显示，11例镜下均见到绿色沉积物（图2E），其中1例肝穿因组织太小，染色不成功。免疫组织化学染色显示，9例轻链蛋白κ 阳性（图2F），1例轻链蛋白λ 阳性，2例轻链κ、λ 均阴性。病理诊断：综合形态学、特殊染色及免疫组织化学染色结果，12例均诊断为肝淀粉样变性。

图2 肝淀粉样变性常规HE染色、特殊染色和免疫组化染色改变

A：HE染色，肝窦周间隙内为均质嗜酸性物质沉积，压迫肝细胞索萎缩甚至消失（40×）。B：HE染色示，动脉壁见均质嗜酸性物质沉积，动脉腔受压呈裂隙状（40×）。C：刚果红染色，视野中肝窦周间隙均质沉积物呈浅砖红色（40×）。D：MT染色，左侧视野为汇管区纤维组织染成蓝色，中央及右侧为淀粉样沉积物染成灰蓝色（40×）。E：SAB染色，肝窦周间隙内均质物染成灰绿色，肝细胞索受压萎缩甚至消失（40×）。F：免疫组织化学染色，轻链蛋白κ 染色阳性，肝窦周间隙均质物呈棕褐色（20×）。

3 讨论

淀粉样变性是由以β 结构淀粉样原纤维沉积在组织中的蛋白质构象疾病，这些淀粉样原纤维主要是自体蛋白质错误折叠和聚集引起，可累及肾脏、肝脏、心脏、周围神经系统和胃肠道，以及骨髓、皮肤等，表现为不同的临床症状。肝脏既是体内淀粉样蛋白清除的主要场所，也是淀粉样蛋白沉积常见的部位，近年来受到广泛的关注[7-9]。

目前已知有40余种人类前体蛋白与淀粉样变性有关，最常见的是轻链淀粉样蛋白（amyloid-like protein，AL）沉积引起的AL型淀粉样变性，与浆细胞增生性疾病有关，又称原发性淀粉样变性，占淀粉样变性的70%左右[9]。目前认为AL-κ 型更容易沉积在肝脏和血管壁，AL-λ 型具有更强的淀粉样变性的特性，倾向于沉积在肾小球[10]。本文总结12例肝淀粉样变性，9例AL-κ 型，1例AL-λ 型，与临床情况和文献报道相符合[11-14]。

传统认为，淀粉样蛋白如果具有典型组织病理学表现，刚果红染色偏振光观察若有“苹果绿”双折光，则可基本确定是淀粉样蛋白沉积，但这种诊断存在观察者间差异及受染色方法的影响。刚果红染色过程中需要分化，该过程较难把握，分化不足或分化过度都会影响染色效果而出现假阴性，造成与纤维组织胶原化、平滑肌玻璃样变性鉴别的难度。另外，淀粉样蛋白沉积物偏少时，特别是穿刺组织，沉积物分布不均、组织又小，偏振光观察较易出现假阴性结果。所以在肝活检发现致密红染无结构样物时，刚果红阴性、偏振光观察不到绿色折光（阴性）时，不要轻易否定淀粉样变性的诊断，一般是采取两种方法：①重复刚果红染色，切片厚度推荐8～10 μm；②建议增加MT染色和SAB染色，以进一步明确诊断。

通过MT染色，淀粉样蛋白染成灰蓝色，而轻链蛋白沉积物染成深红色，胶原、纤维染成深蓝色。SAB染色，淀粉样蛋白染成灰绿色，轻链蛋白沉积物染成砖红色，纤维组织、肌肉、细胞胞质染成淡黄色。经过MT和SAB染色，淀粉样蛋白能显著地区别于轻链蛋白等其他蛋白物质，特别是SAB染色过程简单，且不需要分化，着色较强且易于区分，仅需普通光学显微镜观察即可，费用低廉，非常有利于基层医院开展相关业务。

鉴别诊断方面，AL型淀粉样变性需要与LCDD鉴别。LCDD属于“单克隆免疫球蛋白沉积病”（monoclonal immunoglobulin deposit disease，MIDD）家族，其特征是非淀粉样单克隆免疫球蛋白，沉积于组织或脏器内，引起器官肿大、功能受损。病理组织检查是鉴别两种疾病的重要手段，虽然LCDD和AL型淀粉样变性的组织学表现相似，但LCDD刚果红染色不会出现苹果绿双折光，并且电镜下也见不到淀粉样变性所见的异常原纤维样结构，而是呈泥沙状或者颗粒状电子致密物。

对受累器官、组织进行κ、λ 轻链的免疫组织化学染色或免疫荧光染色亦对淀粉样变性与轻链沉积病鉴别很重要[15]。本文12例肝淀粉样变性患者中有10例（9例AL-κ 型，1例AL-λ 型）轻链型，另2例其κ、λ 检测均阴性，考虑有两种可能性，一是作为穿刺样本，组织小且沉积物分布不均导致假阴性；二是不能除外非AL沉积可能。轻链检测方法有免疫组织化学染色、免疫荧光染色和质谱技术，条件允许推荐使用免疫荧光技术。免疫组织化学染色容易出现明显的背景色，影响观察结果，而质谱技术目前尚不普及，检测价格昂贵。

综上所述，淀粉样变性是一种少见的、可累及多脏器如肝脏、肾脏等的疾病，临床表现复杂且缺乏特异性，没有病理检查之前容易漏诊、误诊。在病理实践中遇到类似淀粉样沉积性病变时，应考虑轻链沉积病的可能，建议同时进行刚果红、MT和SAB特殊染色进行综合分析。

利益冲突声明：本文所有作者均声明不存在利益冲突。

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Clinical and pathological observation of 12 cases of amyloidosis

MEI Xue1 LYU Fudong2 CHEN Guangyong1▲

1.Department of Pathology,Beijing Friendship Hospital,Capital Medical University,Beijing 100050,China;2.Department of Pathology,Beijing Youan Hospital,Capital Medical University,Beijing 100069,China

[Abstract] Objective To summarize the clinical and pathological data of patients with amyloidosis,and to explore its pathological characteristics and the significance of special staining.Methods The data of 12 patients with hepatic amyloidosis diagnosed by pathological biopsy at Beijing Friendship Hospital,Capital Medical University and Beijing Youan Hospital,Capital Medical University from January 2012 to April 2024 were retrospectively analyzed.The biopsy wax was used for Congo red,Masson trichrome（MT）,sulfated alcian blue (SAB)special staining to summarize and generalize their clinicopathological Characteristics.Results Among the 12 patients with hepatic amyloidosis，there were 6 males and 6 females with an median age was 53(32 to 74)years.The main clinical manifestations were abdominal pain 6 cases(50.0%)，abdominal distension 6 cases (50.0%),and aversion to oil and fatigue 5 cases (41.7%).The laboratory tests mainly showed abnormal liver function 10 cases(83.3%),as well as varying degrees of hypoalbuminemia 5 cases(41.7%)and proteinuria 4 cases (33.3%).Imaging examination revealed that abdominal CT/MRI mainly showed diffuse liver disease and varying degrees of liver enlargement(10/12,83.3%).Histological findings showed that amyloid deposits were observed between cells in all 12 cases under routine HE staining and light microscopy.These substances were diffusely distributed in the perisinusoidal space of the liver,with 5 cases depositing on the vascular wall.12 cases of Congo red staining showed orange red/brick red,MT showed blue gray/light blue.A total of 11 cases of SAB staining showed green.Nine cases were positive for immunohistochemistry light chain protein κ.Combined with HE staining,special staining,andimmunohistochemicalstaining,pathological examination confirmed hepatic amyloidosis.Conclusion Amyloidosis with liver involvement as the prominent manifestation,is more common in the elderly,often combined with liver and kidney function damage.Its clinical manifestations show diversity and lack of specificity.Its definite diagnosis confirmed by pathological biopsy and needs to be differentiated from light chain deposition disease.

[Key words] Amyloidosis;Liver injury;Special staining

[中图分类号] R575.5；R446.8

[文献标识码] A

[文章编号] 1673-7210（2025）08（b）-0068-04

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2025.23.12

▲通讯作者

（收稿日期：2025-05-13）

（修回日期：2025-06-08）