樟帮蜜麸炒山药质量标准研究

魏学鑫, 卜俊文, 袁娟丽, 叶喜德, 彭玲珍

【作者机构】 江西中医药大学药学院; 宜春市袁州区妇幼保健计划生育服务中心药剂科; 江西中医药大学附属医院肿瘤科
【分 类 号】 R284.1
【基    金】 江西省中医药标准化技术委员会标准化项目(2024A031) 江西省重点研发计划项目(20232BBG70013)。
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樟帮蜜麸炒山药质量标准研究

樟帮蜜麸炒山药质量标准研究

魏学鑫1 卜俊文1 袁娟丽1,2 叶喜德1 彭玲珍3

1.江西中医药大学药学院,江西南昌 330004;2.宜春市袁州区妇幼保健计划生育服务中心药剂科,江西宜春 336000;3.江西中医药大学附属医院肿瘤科,江西南昌 330004

[摘要] 目的 建立樟帮蜜麸炒山药中药饮片质量标准。方法 对山药样品粉末进行显微鉴别和薄层色谱鉴别;参照2020年版《中华人民共和国药典》测定样品的水分、总灰分、水溶性浸出物;采用高效液相色谱法测定样品中尿囊素、腺苷含量,采用紫外分光光度法测定多糖含量。结果 山药生品含水量为8.32%~14.06%,炮制品含水量为5.69%~8.03%;生品总灰分为1.04%~4.22%,炮制品为1.22%~3.33%;生品浸出物为3.76%~13.56%,炮制品为4.59%~12.49%。多糖、尿囊素、腺苷分别在5.128~102.560、45.36~567.00、1.804 8~22.560 0 μg/ml范围内呈现良好的线性关系,平均回收率分别为99.07%、102.98%、98.07%,RSD分别为2.58%、1.31%、0.91%。结论 所建立的质量标准方法可为蜜麸炒山药的研究提供参考。

[关键词] 蜜麸炒山药;尿囊素;腺苷;多糖;质量标准

山药为薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。味甘,性平,归脾、肺、肾经,补脾养胃,生津益肺,补肾涩精,用于脾虚食少,久泻不止,肺虚喘咳等症[1]。山药始载于《神农本草经》,列为上品[2]。山药富含多糖、皂苷、尿囊素等活性物质,增强免疫力、抗衰老及治疗糖尿病等作用[3]。在山药众多炮制品中,仅有麸炒山药被2020年版《中华人民共和国药典》[1]收录。蜜麸炒山药是樟帮特色炮制品种,结合麦麸与蜂蜜的辅料特性,赋予山药独特的药效与风味。对山药生品及不同炮制品总黄酮含量进行测定,以蜜麸炒山药皮质部位的最高,黄酮类成分具有抗氧化作用,为山药研究提供参考依据[4]。本研究对不同批次山药进行鉴别和含量测定,拟定质量标准,为山药的深入研究和临床应用提供坚实的科学依据和技术支撑。

1 材料仪器

BSA224S-CW型十万分之一天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);FA1004N型万分之一天平(上海精密仪器有限公司);KQ-500E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);111B型二两装高速中药粉碎机(瑞安市永利制药机械有限公司);GZX-9076MBE型电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂);HH-6型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);Nikon DS-Ri2型显微成像系统(尼康仪器有限公司);UV-2550紫外分光光度计(苏州岛津公司);1260型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司);SX2-2.5-12N型马弗炉(上海一恒科学仪器有限公司)。

葡萄糖对照品(批号:WKQ-0776159,纯度≥98%);尿囊素对照品(批号:WKQ-0003182,纯度≥98%);腺苷对照品(批号:WKQ-0000895,纯度≥98%)均购自四川省维克奇生物科技有限公司;山药对照药材(批号:DYS8120,纯度:BR,上海索实生物科技有限公司);浓氨试液(上海博飞美科化学科技有限公司);苯酚(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);硫酸(分析纯,成都市科隆化学品有限公司);乙醇(分析纯)、甲醇(分析纯)、乙酸乙酯(分析纯)均购自四川西陇科学有限公司;甲醇[色谱纯,赛默飞世尔科技(中国)有限公司];蜂蜜(上海冠生园蜂制品有限公司);水为娃哈哈纯净水。

本研究收集河南、河北不同产地山药16批,经江西中医药大学中药鉴定室刘应蛟副教授鉴定为薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎,药材信息见表1。

表1 药材信息

2 方法与结果

2.1 炮制方法

蜜麸制备:将水与炼蜜混匀后,与麦麸搅拌均匀,置锅内,文火炒至不黏手,取出,放凉。蜜量为麦麸量的30%,水量为蜜量的50%,炮制时间90 s,炮制温度90 ℃[5]

蜜麸炒山药:武火将锅底烧热,倒入蜜麸快速翻炒,待冒青烟时,投入山药片,不断翻炒,至转微黄取出,筛去蜜麸,晾凉。

2.2 性状、显微鉴别

方法:山药粉末显微制片,用解剖针挑取少量粉末放在载玻片上,滴1~2滴稀甘油,搅拌均匀,盖上盖玻片,用滤纸吸去多余液体,将制好的玻片放在显微镜下观察。见表2、图1。

图1 蜜麸山药显微图

A:草酸钙针晶束;B:淀粉粒;C:导管;D:螺纹导管、环纹导管。

表2 山药性状、显微鉴别

性状及显微鉴别结果:呈类圆形、椭圆形或不规则的厚片。表面类白色或淡黄白色,质脆,易折断,切面类白色,富粉性。气微,味淡、微酸,嚼之发黏。呈类圆形、椭圆形或不规则厚片。表面色泽加深,呈现微黄色,偶见局部焦斑,具特异焦香气。粉末类白色。淀粉粒单粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形,直径8~35 μm,脐点点状、人字状、十字状或短缝状,可见层纹;复粒稀少,由2~3分粒组成。草酸钙针晶束存在于黏液细胞中,长约至240 μm,针晶粗2~5 μm。具缘纹孔导管、网纹导管、螺纹导管及环纹导管直径12~48 μm。

2.3 薄层鉴别

参照2020年版《中华人民共和国药典》[1]山药项下的薄层色谱鉴别方法,分别于日光和紫外光灯(365 nm)下检视,见图2。

图2 山药生品及蜜麸山药薄层鉴别图

A:山药生品(日光下);B:山药炮制品(日光下);C:蜜麸山药生品(紫外光下);D:蜜麸山药炮制品(紫外光下)。1:山药对照药材;2~17:16批山药生品及炮制品。

2.4 水分、灰分、浸出物检测

参照2020年版《中华人民共和国药典》[1]第四部水分测定法(通则0832第二法)、总灰分测定法(通则2302)、水溶性浸出物测定法(通则2201)项下冷浸法,对16批山药生品及炮制品进行测定。

16批山药生品(S1~16)含水量为8.32%~14.06%,平均值为12.09%;总灰分为1.04%~4.22%,平均值为2.02%;水溶性浸出物含量为3.76%~13.56%,平均值为6.90%;测定结果见表3。

表3 山药生品水分、灰分和浸出物测定结果(n=2)

16批蜜麸山药(P1~16)含水量为5.69%~8.03%,平均值为7.23%;总灰分为1.22%~3.33%,平均值为2.01%;水溶性浸出物含量为4.59%~12.49%,平均值为7.12%;测定结果见表4。

表4 蜜麸山药水分、灰分和浸出物测定结果(n=2)

2.5 多糖测定方法

2.5.1 检测方法 采用紫外-可见分光光度法测定,多糖含量以无水葡萄糖计。供试品溶液和对照品溶液均于490 nm波长处测定吸光度。

2.5.2 对照溶液制备 取无水葡萄糖对照品,加水制成浓度25 μg/ml,作为对照品溶液。

2.5.3 供试品溶液制备 取山药粉末(过3号筛)0.4 g于具塞锥形瓶中,精密加水100 ml,水浴回流1 h,放冷,补重,离心(4 000 r/min,6 min),取上清液1 ml于25 ml容量瓶中,加水定容至刻度,吸取2 ml,置10 ml具塞试管中,加5%苯酚1 ml、硫酸5 ml,摇匀,60℃水浴反应15 min,放冷,加水至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

2.6 尿囊素、腺苷测定方法

2.6.1 色谱条件 色谱柱:UItimateR Polar RP(5 μm,4.6 mm×250 mm);甲醇(A)-纯水(B)为流动相进行梯度洗脱(0~8 min,2%A;8~22 min,2%→25%A),进样量10 μl,流速0.5 ml/min,柱温30 ℃,检测波长224、260 nm。在该条件下进样成分与相邻峰均能有效分离,结果见图3。

图3 山药对照品及样品的高效液相色谱图

A:对照品溶液;B:供试品溶液。1:尿囊素;2:腺苷。

2.6.2 对照品溶液的制备 精密称取尿囊素对照品10 mg,置于10 ml容量瓶中,加水使其充分溶解后,定容至刻度,混合均匀,配成浓度为1 mg/ml的对照品储备液。再取1 ml对照品储备液于10 ml的容量瓶,加水定容至刻度,混合均匀,制成浓度为0.1 mg/ml的尿囊素对照品溶液。

精密称取腺苷对照品10 mg,置于50 ml容量瓶中,加水使其充分溶解后,定容至刻度,混合均匀,配成浓度为0.2 mg/ml的对照品储备液。再取1 ml对照品储备液于100 ml的容量瓶,加水定容至刻度,混合均匀,制成浓度为2 μg/ml的腺苷对照品溶液。

2.6.3 供试品溶液制备 取山药粉末(过3号筛),精密称取1.0 g,置于50 ml具塞锥形瓶中,加20%乙醇25 ml,超声处理20 min(功率240 W,频率45 kHz),放冷,补重,摇匀,0.22 μm微孔滤膜滤过,即得。

2.7 方法学考察

2.7.1 线性关系考察 取25.64 mg葡萄糖对照品置于25 ml容量瓶中,加水稀释10倍成浓度102.56 μg/ml的溶液作为母液,分别取母液0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 ml置于6个10 ml具塞试管中,加水定容至刻度,制成不同质量浓度的对照品溶液。取腺苷对照品5.64 mg置于50 ml容量瓶中,加水定容至刻度,作为腺苷对照品溶液;取尿囊素对照品5.67 mg置于10 ml容量瓶中,加腺苷对照品溶液2 ml,加水定容至刻度,作为混合对照品母液;分别取母液2 ml置于25 ml容量瓶中、1 ml置于10 ml容量瓶中、2 ml置于10 ml容量瓶中、1 ml置于2 ml容量瓶中,均加水定容至刻度,再取适量混合对照品母液,制成5份不同质量浓度的对照品溶液。测定吸光度及峰面积,分别以多糖的吸光度、尿囊素和腺苷的峰面积(Y)为纵坐标,质量浓度(X)为横坐标,进行线性回归,在线性范围内有良好的线性关系,结果见表5。

表5 各成分线性关系

2.7.2 精密度试验 取“2.5.2”项下的对照品溶液,按“2.5.1”项下的检测方法测定吸光度6次,得多糖的RSD为0.09%;取“2.6.2”项下的对照品溶液,按“2.6.1”项下的色谱条件进样6次,得尿囊素、腺苷的RSD分别为0.59%、0.64%,提示仪器精密度良好。

2.7.3 稳定性试验 精密吸取“2.5.3”项下的供试品溶液,室温下放置0、0.5、1.0、1.5、2、2.5、3 h,按“2.5.1”项下的检测方法测定吸光度,得多糖的RSD为1.15%;取“2.6.3”项下的供试品溶液,室温下放置0、2、4、6、8、12 h,按“2.6.1”项下的色谱条件进样,得尿囊素、腺苷的RSD分别为1.30%、0.42%,提示供试品稳定性良好。

2.7.4 重复性试验 按“2.5.3”项下方法制备供试品溶液,平行6份,按“2.5.1”项下的检测方法测定吸光度,得多糖的RSD为2.09%;按“2.6.3”项下方法制备供试品溶液,平行6份,在“2.6.1”项下的色谱条件测定,得尿囊素、腺苷的RSD分别为1.66%、0.71%,提示该方法重复性良好。

2.7.5 加样回收率试验 精密称取已知成分含量的山药供试品0.5 g,共6份,分别加入适量对照品,分别按“2.5.3”“2.6.3”项下方法制备供试品溶液,记录吸光度、峰面积,得多糖、尿囊素、腺苷的平均加样回收率分别为99.07%、102.98%、98.07%,RSD分别为2.58%、1.31%、0.91%,提示该方法准确可行。

2.8 样品含量测定

分别按“2.5.3”“2.6.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.5.1”“2.6.1”项下方法测定16批山药生品及炮制品中多糖、尿囊素、腺苷含量。

16批山药生品(S1~16)多糖含量为12.162 8~205.475 4 mg/g,平均值为95.768 1 mg/g;尿囊素含量为2.098 3~3.772 6 mg/g,平均值为2.951 1 mg/g;腺苷含量为0.047 2~0.090 3 mg/g,平均值为0.070 5 mg/g。见表6。

表6 山药生品含量测定

16批蜜麸山药(P1~16)多糖含量为47.951 0~279.059 9 mg/g,平均值为153.800 0 mg/g;尿囊素含量为2.562 8~4.636 6 mg/g,平均值为3.315 8 mg/g;腺苷含量为0.057 3~0.102 3 mg/g,平均值为0.081 7 mg/g,结果见表7。

表7 蜜麸山药含量测定

3 讨论

樟帮蜜麸炒山药采用双重辅料蜜麸对药物进行炮制,既借麦麸健脾和中之力,又合蜂蜜甘缓益脾之效,更好地缓和了生品燥烈之性,增强理气健脾的功效,并使得饮片色泽更加艳丽有光泽[6]

宿婷婷等[7]从多个维度对山药的质量标志物进行预测分析,初步预测了山药多糖、薯蓣皂苷元、尿囊素、尿嘧啶、腺苷等成分可作为山药的质量标志物。多糖具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功效,在保健食品和药品的开发方面具有广阔的应用前景[8-9]。尿囊素不仅有滋润皮肤的作用,还具有局麻和促进皮肤伤口愈合的功能[10-11]。腺苷具有舒张血管、抗心律失常和保护心肌的作用[10、12-13]。研究发现,尿囊素还被用于治疗糖尿病、骨髓炎、肝硬化及癌症[14-15]。故本研究拟以多糖、尿囊素和腺苷的含量作为蜜麸炒山药的质量标准指标,山药经蜜麸炒后多糖、尿囊素和腺苷含量整体均有不同程度的升高。

综上所述,初步规定蜜麸炒山药的性状为形如山药,断面黄白色或淡黄色,部分渐变黄色,偶见焦斑,略有焦香气;显微鉴别与薄层鉴别同山药项;建议水分≤10.0%,总灰分≤4.0%。根据平均值下浮20%,建议水溶性浸出物≥5.70%,尿囊素含量≥2.65 mg/g,多糖含量≥123.04 mg/g,腺苷含量≥0.07 mg/g。

本研究初步拟定了蜜麸山药的质量标准,为后续相关研究提供了实验依据。但2个产地16批样品的测定结果不足以代表所有山药的质量标准,需开展更多相关研究以完善其质量标准。

利益冲突声明:本文所有作者均声明不存在利益冲突。

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Study on quality standard of Zhangbang honey bran stir fried Dioscoreae Rhizoma

WEI Xuexin1 BU Junwen1 YUAN Juanli12 YE Xide1 PENG Lingzhen3

1.School of Pharmacy,Jiangxi University of Chinese Medicine,Jiangxi Province,Nanchang 330004,China;2.Department of Pharmacy,Yuanzhou District Maternal and Child Health and Family Planning Service Center of Yichun City,Jiangxi Province,Yichun 336000,China;3.Department of Oncology,Affiliated Hospital of Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,Jiangxi Province,Nanchang 330004,China

[Abstract] Objective To establish the quality standard of Zhangbang honey bran stir fried Dioscoreae Rhizoma decoction pieces.Methods Microscopic identification and thin layer chromatography identification of Rioscoreae Rhizoma sample powder ;the moisture,total ash and water-soluble extract of the samples were determined according to the 2020 edition of the Pharmacopoeia of People’s Republic of China.The contents of allantoin and adenosine in the samples were determined by high performance liquid chromatography,and the content of polysaccharide was determined by ultraviolet spectrophotometry.Results The water content of raw Rioscoreae Rhizoma was 8.32%-14.06%,and the water content of processed Dioscoreae Rhizoma was 5.69%-8.03%.The total ash content of raw products was 1.04%-4.22%,and that of processed products was 1.22%-3.33%.The extract of raw products was 3.76%-13.56%,and the extract of processed products was 4.59%-12.49%.Polysaccharide,allantoin and adenosine showed a good linear relationship in the range of 5.128-102.560,45.36-567.00 μg/ml and 1.804 8-22.560 0 μg/ml,respectively.The average recovery was 99.07%,102.98%and 98.07%,respectively,and the RSD was 2.58%,1.31%and 0.91%,respectively.Conclusion The established quality standard method can provide reference for the study of honey bran stir fried Dioscoreae Rhizoma.

[Key words] Honey bran stir fried Dioscoreae Rhizoma;Allantoin;Adenosine;Polysaccharide;Quality standard

[中图分类号] R284.1

[文献标识码] A

[文章编号] 1673-7210(2025)12(c)-0038-05

DOI:10.20047/j.issn1673-7210.2025.36.07

[基金项目] 江西省中医药标准化技术委员会标准化项目(2024A031);江西省重点研发计划项目(20232BBG70013)。

[通讯作者] 彭玲珍(1986-),女,硕士,主要从事肿瘤的中西医结合治疗及基础研究工作。

(收稿日期:2025-07-16)

(修回日期:2025-10-04)

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