阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种进行性神经退行性疾病，主要影响老年人的认知功能，包括记忆、思维和行为能力[1]。随着全球人口老龄化的加剧，AD的患病率呈上升趋势。相关资料显示，2022年中国AD患者人数已达约1 000万，占全球患者总数的四分之一[2]。目前，AD的诊断主要依赖于临床症状、神经心理测试及影像学检查等方法[3-4]。实践中发现，临床症状和神经心理测试往往在疾病的中晚期才能发现明显的异常，对于早期诊断的灵敏度和特异度不高；影像学检查虽能提供有关大脑结构和功能的信息，但因其价格昂贵、操作复杂，故难以在基层医疗机构广泛应用。因此，寻找简单、有效的生物学标志物以辅助早期诊断显得尤为重要。长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是一类不编码蛋白质的RNA，牛磺酸上调基因1（taurineupregulatedgene1，TUG1）是近年来受到广泛关注的lncRNA，研究发现lncRNA TUG1参与神经元凋亡的调控，沉默lncRNA TUG1可抑制小鼠的神经组织损伤及神经炎症[5-6]。微RNA（microRNA，miRNA）为多个核苷酸组成的非编码小分子，在中枢神经系统的组织发育、细胞分化、神经损伤和疾病发生、发展等过程中都具有重要作用[7]。有学者认为，神经元减少是AD的病理学特点之一，而抑制miR-218-5P表达能促进胚胎神经干细胞向神经元分化[8]。NOD样受体蛋白1（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 1，NLRP1）是一种多结构域支架蛋白，在神经炎症当中发挥重要的作用[9]。国外有研究显示，与非AD患者相比，AD患者大脑中的NLRP1免疫阳性神经元增加近32倍，通过减少NLRP1的激活，可减少神经元死亡，促进神经功能恢复[10]。基于此，本研究将探讨AD患者的血清lncR NATUG1、miR-218-5p、NLRP1表达水平与患者简易精神状态量表（mini-mental state examination，MMSE）评分的关系，并对其诊断效能进行评价。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年12月至2024年12月青海大学附属医院收治的130例AD患者作为研究对象，并将其归为观察组。纳入标准：①符合《中国阿尔茨海默病痴呆诊疗指南（2020年版）》[11]相关标准；②患者监护人均知情研究；③初中及以上学历患者MMSE评分＜24分、小学学历患者MMSE评分＜20分、文盲患者MMSE评分＜17分；④颅脑CT或头颅磁共振成像检查确认，存在海马区或其他皮质部位的萎缩现象。排除标准：①合并自身免疫性疾病；②合并心脑血管及肝肾等疾病；③其他因素所致的认知功能受损或痴呆状态（例如梅毒感染、维生素B12 缺乏症、药物不良反应等）；④合并恶性肿瘤。另选取2021年12月至2024年12月在青海大学附属医院进行体检的100名健康者作为健康组。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 两组一般资料比较

样本量计算公式为：N1=N2=2×[（u1-α+u1-β/2）S/δ]2，根据文献研究，取δ=3.20，标准差S=6.50，u1-α=1.96，u1-β/2=1.28，经计算，两组样本量各87例，考虑10%的样本量脱落率，每组至少96例。本研究经青海大学附属医院医学伦理委员会审查批准（P-SL-2023212）。

1.2 研究方法

1.2.1 资料收集 收集两组一般资料与实验室检测指标，包括年龄、性别、受教育年限及血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平。

1.2.2 相关血清指标检测 所有参与者在入组时均抽取5 ml晨起空腹外周血，使用德国Eppendorf公司Centrifuge 5920 R离心机，以3 000 r/min的速度（离心力1 000×g，离心半径为10 cm）离心10 min，随后收集分离出的上层血清置于-80℃冰箱保存备用。采用酶联免疫吸附试验法测定血清NLRP1水平，试剂盒（生产批号：202405A）购自上海将来实业公司；通过荧光定量PCR技术检测受试者血清miR-218-5p、lncRNA TUG1的表达量；RNA提取及定量检测：依照miRNA提取试剂盒（北京天根生化有限公司）操作说明，规范提取血清总miRNA。随后，利用紫外分光光度计（美国Beckman公司）测定RNA的浓度与纯度（所有样本A260/A280 比值在1.8～2.1，提示RNA纯度合格；并随机抽取10%样本通过Agilent 2100 Bioanalyzer检测RNA完整性，RIN值均＞7.0，表明RNA完整性良好），并反转录生成cDNA。以此为模板，进行荧光定量PCR检测。以U6 snRNA作为miR-218-5p的内参基因，以GAPDH作为lncRNA TUG1的内参基因。据说明书配制20 μl PCR反应体系，反应步骤如下：95℃预热2 min，接着进行40个循环，每个循环包括95℃变性20 s，60℃退火20 s，72℃延伸30 s；最后进行熔解曲线分析，条件为95℃15 s，60℃60 s，再回到95℃15 s。利用2-ΔΔCt 法计算血清miR-218-5p、lncRNA TUG1的表达水平。

1.2.3 认知功能评分的测定 运用MMSE评估AD患者的认知功能，其中轻度：MMSE评分为21～26分；中度：MMSE评分为10～20分；重度：MMSE评分≤9分[12]。依据评分结果将130例AD患者分为轻度组（52例）、中度组（38例）、重度组（40例）。该量表具有良好的信度与效度：内部一致性信度Cronbach’s α 系数为0.89，重测信度组内相关系数为0.94。

1.3 统计学方法

采用SPSS 26.0统计学软件对数据进行分析。符合正态分布的计量资料采用均数±标准差（）表示，比较用t检验，多组数据比较采用单因素方差分析；计数资料采用例数或百分率表示，比较用χ2 检验；采用Pearson法行相关性分析，根据受试者操作特征（receiver operator charactenstic，ROC）曲线及Delong检验评价血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1对AD患者的诊断价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平、MMSE评分比较

观察组血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平均高于健康组，MMSE评分低于健康组（P＜0.05）。见表2。

表2 两组血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平、MMSE评分比较（）

注lncRNA TUG1：长链非编码RNA牛磺酸上调基因1；NLRP1：NOD样受体蛋白1；MMSE：简易精神状态量表。

2.2 不同严重程度AD患者血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平比较

重度组血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平高于中度组、轻度组（P＜0.05）；中度组miR-218-5p水平、lncRNA TUG1、NLRP1水平高于轻度组（P＜0.05）。见表3。

表3 不同严重程度AD患者血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平比较（）

注 与轻度组比较，aP＜0.05；与中度组比较，bP＜0.05。AD：阿尔茨海默病；lncRNA TUG1：长链非编码RNA牛磺酸上调基因1；NLRP1：NOD样受体蛋白1。

2.3 血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平与MMSE评分的相关性分析

Pearson相关性分析结果显示，血清lncRNATUG1、miR-218-5p、NLRP1与MMSE评分呈负相关（r=-0.670、-0.645、-0.514，P＜0.001）。

2.4 血 清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1对AD的诊断价值

将AD患者血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NL RP1作为检验变量绘制ROC曲线，结果显示，血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1单独诊断AD的曲线下面积（area under the curve，AUC）分别为0.860、0.732、0.905，三者联合诊断AD的AUC为0.968，高于任一单独诊断（Z=3.988、6.361、2.926，P＜0.05）。见表4、图1。

图1 血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1水平诊断AD的ROC曲线

lncRNA TUG1：长链非编码RNA牛磺酸上调基因1；NLRP1：NOD样受体蛋白1；AD：阿尔茨海默病；ROC：受试者操作特征。

表4 血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1对AD的诊断价值

注lncRNA TUG1：长链非编码RNA牛磺酸上调基因1；NLRP1：NOD样受体蛋白1；AD：阿尔茨海默病；AUC：曲线下面积。

3 讨论

AD是老年人群体中常见的神经退行性病变，特征为认知与行为障碍，其核心病理涉及Aβ 斑块引发的神经退化、神经原纤维缠结、突触功能失常、神经递质平衡紊乱、神经炎症及氧化应激等机制，严重影响其生活质量[13]。现阶段，临床尚无特效药物预防或治疗AD，寻找更为有效的疾病管理策略、提高早期诊断意识及准确率已经成为当前研究的热点之一[14-15]。

miRNA是一类长度较短的非编码RNA分子，其在基因表达调控中发挥着重要作用。近年来，研究者在AD动物与细胞模型中，观测到多种miRNA的变化，并明确其作用靶点，表明miRNA在AD的发生与发展过程中发挥着调控作用[16-17]。有研究表明，AD患者相较于正常人，在其血液、外泌体及脑脊液等体液中，miRNA的表达水平呈显著差异[18]。血清miR-218-5p通过与靶mRNA的特定序列互补结合，抑制靶基因的翻译或促进其降解，从而影响细胞的生理和病理过程。罗宇等[19]研究指出，miR-218-5p对于维持神经元细胞的正常活性可能起着关键作用，其表达水平的变化直接影响神经元细胞的功能状态。王丹蕾等[20]研究发现，miR-218-5p能够通过对Wnt/β-catenin信号通路的调控，逆转MPTP诱导的小鼠急性帕金森病模型中黑质多巴胺能神经元退化，表明其具备成为帕金森病治疗新靶点的潜力。童娟等[21]研究认为，miR-218-5p可作为AD临床辅助诊断的一个潜在生物标志物。Pearson相关性分析表示，血清miR-218-5p与MMSE评分呈负相关（r=-0.645，P＜0.001）。提示miR-218-5p与AD的发生与进展相关，可反映患者疾病的严重程度。

lncRNA TUG1位于人体22Q12染色体上，长约7.1 kD，是神经系统发育的重要调控因子[22]。Yao等[23]研究表明，lncRNA TUG1在脑卒中发生后的早期阶段于小胶质细胞中呈高表达状态，且介导NLRP3炎症小体依赖性的小胶质细胞焦亡及神经损伤。Cheng等[24]研究指出，在帕金森病患者血清中lncRNA TUG1水平上调；降低lncRNA TUG1表达能有效抑制脑部炎症因子水平，提高其运动协调能力。国外一项基础研究显示，敲低lncRNA TUG1通过miR-421/mTOR轴减轻海马神经元损伤，抑制神经元凋亡[25]。荆菁华等[26]研究显示，AD患者血清及脑脊液lncRNA TUG1表达高于健康人群，且在AD患者中轻、中、重度组血清及脑脊液lncRNA TUG1依次增加，这与本研究结果一致。提示lncRNA TUG1可能参与AD的发生，且与疾病的严重程度有关。

炎症反应在AD整个发病过程中起着重要作用，与神经功能退行性改变、认知功能下降密切相关[27]。NLRP1主要在锥体神经元和少突胶质细胞中表达，有研究表明，NLRP1在驱动神经炎症及脑损伤病理生理过程中，与蛛网膜下腔出血早期脑损伤、脑卒中时的缺血性脑损伤及创伤性脑损伤等密切相关[28]。国内一项基础研究显示，通过靶向抑制NLRP1表达，能有效拯救神经元的凋亡和细胞焦亡、减轻AD小鼠记忆障碍、神经元损伤[29]。NLRP1炎症小体可能成为抗AD药物作用的潜在新靶点[30]。在本研究中，观察组NLRP1水平显著高于健康组，重度组显著高于轻度组，Pearson相关性分析结果表示，NLRP1与MMSE评分呈负相关（r=-0.514，P＜0.001）。提示NLRP1水平升高可导致认知功能下降，引起或促进AD。本研究通过绘制ROC曲线评价血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1对AD的诊断价值，结果显示，血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1单独诊断AD的AUC值分别为0.860、0.732、0.905，三者联合诊断AD的AUC值为0.968，高于任一单独诊断（P＜0.05）。提示联合检测相较于血清lncRNA TUG1、miR-218-5p、NLRP1单独检测具有更高的诊断效能，可为AD的早期诊断、病情监测及个性化治疗提供新的思路和依据。

综上所述，血清lncRNA TUG1、miR-218-5p及NLRP1的水平与AD的发生和疾病严重程度密切相关，三者联合检测在AD的诊断及疾病进展监测中具有较高的应用价值。但本研究的所有样本均来源于单中心，可能存在一定的选择偏倚，且未能对lncRNA TUG1、miR-218-5p及NLRP1参与AD发病与进展的具体作用机制进行探索，无法确定其因果关系。未来可通过多中心、大样本量研究进一步验证，并结合基础实验探索lncRNA TUG1、miR-218-5p及NLRP1参与AD的具体机制，以提高结果的可靠性和说服力。

利益冲突声明：本文所有作者均声明不存在利益冲突。

[参考文献]

[1]REN R，QI J，LIN S，et al.The China Alzheimer report 2022[J].General Psychiatry，2022，35（1）：e100751.

[2]KAZEMI M，SADEH N R，KHANIANI S M，et al.Identification of RN7SK LncRNA as a novel biomarker in Alzheimer’s disease using bioinformatics and expression analysis [J].Sci Rep，2024，14（1）：31192-31192.

[3]唐易，邱昌盛，吴婷.miR-137，Aβ，Tau蛋白与阿尔茨海默病认知功能，炎症因子及预后相关性[J].临床和实验医学杂志，2023，22（23）：2469-2473.

[4]李晴，岳希鹏，白岩，等.多模态影像技术在阿尔茨海默病早期诊断中的应用价值[J].磁共振成像，2022，13（11）：5.

[5]XUE L X，CHEN S F，XUE S X，et al.lncRNA TUG1 compromised neuronal mitophagy in cerebral ischemia/reperfusion injury by targeting sirtuin 1[J].Cell Biol Toxicol，2022，38（6）：1121-1136.

[6]ZHAI K，LIU B，GAO L.Long-noncoding RNA TUC1 promotes Parkinson’s disease via modulating miR-152-3p/PTENpathway[J].Hum Gene Ther，2020，31（23/24）：1274-1287.

[7]LÓPEZ R J M，WENCES J H，ROSA L D C I M，et al.miR-218-5p，miR-124-3p and miR-23b-3p act synergistically to modulate the expression of NACC1，proliferation，and apoptosis in C-33A and CaSki cells[J].Noncoding RNA Res，2024，9（3）：720-731.

[8]张凤兰.TAG1/APP通过调控miR-218-5p抑制胚胎神经干细胞分化为神经元及机制研究[D].昆明：昆明医科大学，2017.

[9]JIA J，LIU H，SU N L，et al.Correction：thioredoxin-1 protects neurons through inhibiting nlrp1-mediated neuronal pyroptosis in models of Alzheimer’s disease [J].Molecular Neurobiology，2025，62（5）：6627.

[10]KAUSHAL V，DYE R，PAKAVATHKUMAR P，et al.Neuronal NLRP1 inflammasome activation of Caspase-1coordinately regulates inflammatory interleukin-1-beta production and axonaldegeneration-associated Caspase-6 activation [J].Cell Death Differ，2015，22（10）：1676-1686.

[11]田金洲，解恒革，王鲁宁，等.中国阿尔茨海默病痴呆诊疗指南（2020年版）[J].中华老年医学杂志，2021，40（3）：269-283.

[12]中华医学会神经病学分会痴呆与认知障碍学组.阿尔茨海默病源性轻度认知障碍诊疗中国专家共识2021[J].中华神经科杂志，2022，55（5）：421-440.

[13]戴莉莉，周涛，卡力比努尔·赛买提，等.血清IL-33在阿尔茨海默病、轻度认知障碍、主观认知下降患者中的表达水平及意义[J].南昌大学学报（医学版），2024，64（4）：35-42.

[14]WANG J，ZHOU F，XIONG C E，et al.Serum sirtuin1：a potential blood biomarker for early diagnosis of Alzheimer’s disease[J].Aging，2023，15（18）：9464-9478.

[15]DIAZ-GALVAN P，PRZYBELSKI S A，ALGECIRASSCHIMNICH A，et al.Plasma biomarkers of Alzheimer’s disease in the continuumof dementia with lewy bodies [J].Alzheimers Dement，2024，20（4）：2485-2496.

[16]WALGRAVE H，BALUSU S，SNOECK S，et al.Restoring miR-132 expression rescues adult hippocampal neurogenesis and memory deficits in Alzheimer’s disease [J].Cell Stem Cell，2021，28（10）：1805-1821.e8.

[17]CHENML，HONGCG，YUET，et al.Inhibition ofmiR-331-3p and miR-9-5p ameliorates Alzheimer’s disease by enhancing autophagy [J].Theranostics，2021，11（5）：2395-2409.

[18]邓天玲，段爱琴，曾敏玲，等.血清miR-340-5p和APPL1水平与老年阿尔茨海默病患者炎症反应与认知功能的相关性[J].热带医学杂志，2022，22（11）：1551-1556.

[19]罗宇，李高炜，王琳，等.右美托咪定对老年患者术后神经认知障碍影响及对miR-218-5p/SNX4信号通路调控作用[J].中国临床药学杂志，2022，31（12）：893-898.

[20]王丹蕾，薛峥，覃奇雄，等.miR-218-5p改善帕金森病小鼠多巴胺能神经元变性[J].神经损伤与功能重建，2022，17（5）：249-253.

[21]童娟，徐宇浩，徐建慧，等.血清miR-218-5p和miR-124-3p在阿尔茨海默病中的表达水平及诊断价值[J].热带医学杂志，2024，24（3）：378-382，453.

[22]XIE H，CHAI H，DU X，et al.Overexpressing long noncoding RNA OIP5-AS1 ameliorates sepsis-induced lung injury in a rat model viaregulating the miR-128-3p/Sirtuin-1 pathway[J].Bioengineered，2021，12（2）：9723-9738.

[23]YAO M L，LUO Y，LI H L，et al.ineRNA Tugl contributes poststroke NLRP3 inflammasome-dependent pyroptosis via miR-145a-5p/T1r4 axis [J].Mol Neurobiol，2022，59（11）：6701-6712.

[24]CHENG J，DUAN Y，ZHANG F，et al.The role of lneRNA TUGl in the Parkinson disease and its effect on mieroglial inflammatory response [J].Neurmolecular Med，2021，23（2）：327-334.

[25]YANG B，LIANG R S，WU X Y，et al.LncRNA TUC1 inhibits neuronal apoptosis in status epilepticus rats via targeting the miR-421/mTOR axis [J].Cell Signal，2020，76（12）：109787.

[26]荆菁华，史九波，安淑霞，等.阿尔茨海默病患者血清和脑脊液长链非编码RNA TUG1和长链非编码RNA BC200表达及意义[J].中华实用诊断与治疗杂志，2021，35（11）：1174-1177.

[27]马婷婷，陈建红，刘爱翠，等.抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用[J].解剖学报，2024，55（1）：32-42.

[28]FLORES J，NOËLA，FILLIONM L，et al.Therapeutic potential of Nlrp1 inflammasome，Caspase-1，or Caspase-6 against Alzheimer disease cognitive impairment[J].Cell Death Differ，2022，29（3）：657-669.

[29]张晗.人参皂苷Rg1通过抑制NLRP1炎症小体活化减轻APP/PS1小鼠的Aβ 沉积和神经元损伤[D].合肥：安徽医科大学，2021.

[30]谭梦姗.靶向调节NLRP1炎症小体介导的神经元焦亡治疗阿尔茨海默病[D].青岛：中国海洋大学，2014.

Expression levels and diagnostic value of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 in Alzheimer’s disease

HE Mingling TANG Yanjiao LIU Junli
Department of Geriatrics，Affiliated Hospital of Qinghai University，Qinghai Province，Xining 810000，China

[Abstract] Objective To investigate the expression levels and diagnostic value of serum long non coding RNA (lncRNA)taurine upregulated gene 1(TUG1)，miR-218-5p，and nucleotide binding oligomerization like receptor protein1(NLRP1)in patients with Alzheimer’s disease (AD).Methods A total of 130 AD patients admitted to Affiliated Hospital of Qinghai University from December 2021 to December 2024 were selected as the observation group，according to the mini-mental state examination(MMSE)，the cognitive function of AD patients was evaluated and they were divided into the mild group(52 cases)，the moderate group(38 cases)，and the severe group(40 cases)，and another 100 healthy individuals who underwent physical examinations at Affiliated Hospital of Qinghai University during the same period were selected as the healthy group.Serum samples of all the research subjects were collected，the levels of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 were measured and Pearson was used to analyze their correlation with disease progression，the diagnostic efficacy of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 in AD patients using receiver operating characteristic curve was evaluated.Results The levels of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 in the observation group were higher than those in the healthy group，the MMSE score was lower than that of the healthy group (P＜0.05);the levels of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 in the severe group were higher than those in the moderate and mild groups(P＜0.05);the levels of lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 in the moderate group were higher than those in the mild group (P＜0.05).Pearson analysis showed that serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 were negatively correlated with MMSE scores (r=-0.670，-0.645，-0.514，P＜0.01).The receiver operating characteristic curve results showed that the area under the curve values of serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 for diagnosing AD alone were 0.860，0.732，and 0.905，respectively.The area under the curve of the combination of the three for diagnosing AD was 0.968，which was higher than any individual diagnosis (P＜0.05).Conclusion Serum lncRNA TUG1，miR-218-5p，and NLRP1 show abnormal expression in AD patients and are closely related to their cognitive function.Combined detection has high diagnostic value for AD.

[Key words] Alzheimer’s disease;miR-218-5p;lncRNA TUG1;NLRP1;Diagnosis;Cognitive function

[中图分类号] R749

[文献标识码] A

[文章编号] 1673-7210（2026）01（c）-0040-05

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.25080757

[基金项目] 国家自然科学基金资助项目（81974283）。

[通讯作者] 刘军莉（1977.2-），女，博士，主任医师；研究方向：老年医学。

（收稿日期：2025-08-11）

（修回日期：2025-11-05）